ZINNIA (DICOTYLEDONE) : LES ELEMENTS VASCULAIRES DU XYLEME

Observations au microscope électronique à balayage (MEB)

Les observations en microscopie électronique à balayage permettent d’identifier le type d’élément vasculaire au sein du xylème. Les images ci-dessous ont été obtenues à partir de préparations simples : le matériel biologique est fixé dans une solution de glutaraldéhyde 2.5% en solution dans un tampon cacodylate de sodium 0.1M pH 7.2. Il est déshydraté par des bains successifs d’alcool, puis déshydraté au point critique et métallisé.

En fonction de l’ornementation des parois des éléments vasculaires du xylème, on peut distinguer :

• A : des éléments vasculaires annelés, spiralés,
• B : des éléments réticulés
• C : des éléments ponctués (Barre d’échelle de 5 µm).

Observation en microscopie confocale

 En microscopie confocale, ces ornementations ont été observées à partir de culture de cellules différenciées en éléments vasculaires. Les observations sont facilitées par la présence d’une forte autofluorescence (excitation dans le proche UV 405 nm et/ou à 488 nm) associée à ces ornementations.

• A : élément vasculaire annelé,
• B : spiralé,
• C : réticulé
• D : ponctué.

Barre d’échelle de 15 µm. Les images sont des projections maximales de 18-22 plans confocaux.

Il est possible d’obtenir des éléments pluricellulaires de type vasculaire et de comparer ces structures différenciées in vitro avec des structures vasculaires in planta.

Ces images ont été obtenues en microscopie à balayage laser et correspondent à une projection maximale de 22 à 24 plans confocaux. Ces éléments vasculaires (A–C) ont été obtenus in vitro (72h de différenciation). Outre les ornementations, on peut visualiser des jonctions (indiquées par une flèche blanche) entre les éléments unitaires (B–D). Barre d’échelle de 10 µm.

In planta, le matériel a été obtenu après une inclusion et coupe de 1µm, les observations ont été faites en microscopie photonique (lumière blanche).

Une section longitudinale d’un hypocotyle, en E,  permet d’observer après coloration au bleu de toluidine : xv, vaisseau du xylème. La flèche blanche indique une paroi séparant deux éléments vasculaires. Les flèches noires montrent des résidus de parois entre deux vaisseaux fonctionnels en continuité. Barre = 10 µm